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更加定制化的分子固定方案：Biacore SIA Kit Au芯片解锁DIY新可能
今天，我们就来详细介绍如何利用这款裸金芯片，定制属于您的分子互作实验！
一
产品描述
该产品适用于Biacore所有机型。
图1：
A：Sensor Surface Au（pack of 10）
B：Sensor Chip Assembly Unit classic
C：Sensor Chip Assembly Unit Series S
D：Protective Sheath classic
E：Sensor Chip Support classic（pack of 10）
F：Sensor Chip Support Series S（pack of 10）
G：Protective Sheath Series S
H：Double-sided Adhesive（pack of 16）
二
传感芯片组装步骤
以下说明中的插图仅表示C系列芯片的组装步骤，对于S系列芯片也采取相同的步骤。
第一步
将传感器芯片支架（E）放置在相应的传感器芯片组装单元（B）上（传感器芯片支架只能以一种方式定向），如图所示：
图2：传感芯片支架放置
第二步
• 取一条胶条（H），取下白色保护罩，将胶条背贴在传感器芯片支架上；
• 将胶条压在支架（E）上，取下胶条衬底；
• 从组装单元（B）上拆下带有胶条的传感器芯片支架（E），并将组装单元（B）转过来。
• 将胶条压在支架（E）上，取下胶条衬底；
• 从组装单元（B）上拆下带有胶条的传感器芯片支架（E），并将组装单元（B）转过来。
如图所示：
图3：安装胶条
第三步
将上一步中的传感芯片放入组装单元（B）的中心位置，玻璃面面向组装单元。确保传感器表面放置平稳，如图所示：
图4：放置玻璃面
第四步
将带胶条的支架（E）放在组装单元（B）上，用力按压，将传感器表面固定在支架上。传感器芯片支架（E）只能以一种方式定向，如图所示：
图5：传感芯片支架制备完成
第五步
确保传感器表面的玻璃面清洁。可使用无绒布擦拭玻璃面或加压氮气，或使用空气吹走颗粒（被加压的气体必须是高质量的，无汽化的油颗粒）。
第六步
将已安装好的传感器芯片支架完全插入传感器芯片外壳（D）中并确保传感器表面方向正确。
三
裸金芯片表面固定方式
方法一
斯洛伐克科学家在Biomedicine&Pharmacotherapy杂志上发表了一篇关于前列腺癌细胞外泌体研究的文章，他们就利用Biacore X100以及Biacore SIA Kit Au芯片，通过表面等离子共振（SPR）技术，探究了外泌体（分析物）与特定受体（配体）的相互作用。
作者使用裸金芯片的方式如下（如图6所示）：
• 将11-mercaptoundecanoic acid（MUA）溶解在乙醇中，配置成5 mM的溶液；
• 将裸金芯片浸泡在上述5 mM MUA溶液中，在室温下孵育过夜（在黑暗条件下进行孵育可以防止MUA被氧化），MUA分子会自发地吸附在金芯片表面，并形成一层有
• 序的单分子层；
• 将芯片从MUA溶液中取出，并用乙醇和纯水清洗，以去除未结合的MUA分子。
• 将裸金芯片浸泡在上述5 mM MUA溶液中，在室温下孵育过夜（在黑暗条件下进行孵育可以防止MUA被氧化），MUA分子会自发地吸附在金芯片表面，并形成一层有
• 序的单分子层；
• 将芯片从MUA溶液中取出，并用乙醇和纯水清洗，以去除未结合的MUA分子。
图6：裸金芯片制作示意图
方法二
郑州轻工业大学发表题为《Surface plasmon resonance aptasensor based on niobium carbide MXene quantum dots for nucleocapsid of SARS-CoV-2 detection》的文章，该文章介绍了一种研发的新型无标记表面等离子共振（SPR）适配体传感器，用于检测SARS-CoV-2病毒衣壳蛋白。该传感器以硫醇修饰的Nb2C-SH QDs作为传感表面，用于固定适配体。
作者使用裸金芯片的方式如下（如图7所示）：
• 使用H2SO4/H2O2（70/30 v/v）溶液清洗芯片1 min，以去除表面的杂质和污染物；
• 使用纯水冲洗芯片，去除残留的清洗液；
• 将芯片在N2气流中干燥，以去除残留的水分；
• 将10 μL Nb2C-SH QDs悬浮液（0.1 mg/mL）滴加到芯片表面（由于硫醇基团与金原子之间的共价键Au-S以及自组装相互作用，Nb2C-SH QDs会均匀地覆盖在芯片
• 表面，形成一层均匀的Nb2C-SH QDs层；
• 将芯片与N58适配体溶液孵育，通过π-π*堆积、静电吸附和氢键等作用，将适配体稳定地固定在Nb2C-SH QDs层上（适配体浓度为100 nM，流速为5 μL/min，固定
• 时间为30 min）。
• 使用纯水冲洗芯片，去除残留的清洗液；
• 将芯片在N2气流中干燥，以去除残留的水分；
• 将10 μL Nb2C-SH QDs悬浮液（0.1 mg/mL）滴加到芯片表面（由于硫醇基团与金原子之间的共价键Au-S以及自组装相互作用，Nb2C-SH QDs会均匀地覆盖在芯片
• 表面，形成一层均匀的Nb2C-SH QDs层；
• 将芯片与N58适配体溶液孵育，通过π-π*堆积、静电吸附和氢键等作用，将适配体稳定地固定在Nb2C-SH QDs层上（适配体浓度为100 nM，流速为5 μL/min，固定
• 时间为30 min）。
图7：裸金芯片表面修饰示意图
方法三
2018年，在Colloids And Surfaces B-biointerfaces杂志发表了题为《Specific binding of human C-reactive protein towards supported monolayers of binary and engineered phospholipids》，其中就利用了Biacore以及Biacore SIA Kit Au研究了CRP蛋白（作为分析物）与磷脂单层膜（配体）的特异性结合。
作者使用裸金芯片的方式如下（如图8所示）：
• 将裸金芯片浸泡在10 mM Tetradecanethiol的乙醇溶液中2h，形成自组装单分子层（SAM）；
• 用乙醇和水冲洗芯片，去除未结合的Tetradecanethiol；
• 制备均匀尺寸的脂质体悬浮液；
• 将脂质体悬浮液注入到Biacore X100芯片，通过脂质体融合过程形成支撑磷脂单分子层；
• 用1 mM NaOH冲洗60 s或缓冲液冲洗60 min，去除松散结合的脂质。
• 用乙醇和水冲洗芯片，去除未结合的Tetradecanethiol；
• 制备均匀尺寸的脂质体悬浮液；
• 将脂质体悬浮液注入到Biacore X100芯片，通过脂质体融合过程形成支撑磷脂单分子层；
• 用1 mM NaOH冲洗60 s或缓冲液冲洗60 min，去除松散结合的脂质。
图8：支撑磷脂单分子层形成示意图
Biacore SIA Kit Au芯片，以其高灵活性、可定制化的操作，为生物分子相互作用研究带来了新的可能。这不仅是实验工具的升级，更是研究思维的解放。无论是药物研发、疾病诊断还是基础研究，都能助您一臂之力，助力您发现更多生命科学的奥秘！