抗体浓度定量新利器 — Biacore™Series S Sensor Chip PrismA重磅来袭!

10 月 29, 2021

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浓度定量作为抗体药物研发、生产质控、批次放行等环节必检项目,历来受到研发生产人员的重视。如何提高浓度定量的精准度与高效性,一直是抗体药物研发生产的关键问题。目前Biacore芯片家族迎来了新成员:Biacore™ Series S Sensor Chip PrismA(Fig 1)。这款专注抗体药物浓度定量的芯片,将会给用户带来全新的体验。接下来,我们详细介绍一下Biacore™Series S Sensor Chip PrismA。
Biacore™ Series S Sensor Chip PrismA

Fig 1. Biacore™ Series S Sensor Chip PrismA suitable for use with Biacore™ systems.

PrismA芯片表面预偶联与MabSelect PrismA™填料相同的重组Protein A,再加之再生条件固定,所以给予用户 ready-to-use 的便利(Fig 2)。
Biacore™ Series S Sensor Chip PrismA

得益于该重组Protein A的优异特性,使得PrismA芯片具有以下特点(Fig 3):

  1. 能够结合来自多种哺乳动物物种的各类抗体,例如人IgG1、IgG2和IgG4亚类;
  2. 与Protein A芯片相比,PrismA芯片增强了位于可变重链上的 VH3 序列的结合亲和力;
  3. 确保了检测的可靠性,每个通道可重复的高亲和力捕获高达上千个循环;
  4. 数据重复性更高,因为PrismA 芯片是在高度控制条件下开发和制造的。
接下来,我们通过一系列实验数据来欣赏PrismA芯片优异的表现。

01

溶于缓冲液中IgG1单克隆抗体浓度定量的检测限LOD与定量限LOQ

使用PrismA芯片针对IgG1单克隆抗体进行浓度定量,检测限LOD与定量限LOQ可达 3 ng/mL 和 10 ng/mL。通过将进样时间从 30s增加至180s时, LOD与LOQ可达0.8 ng/mL 和2 ng/mL。当然确切的检测限不仅取决于Series S Sensor Chip PrismA还将取决于使用抗体特性和仪器类型。

Fig 4. LOD and LOQ for 30 s contact time (A) and 180 s contact time (B).Plots show the response levels of blanks (i.e., buffer injections) and the lowest concentration calibration and control sample points. LOD and LOQ response levels are indicated with dashed lines. The calibration curve fits are shown as solid lines.

02

溶于缓冲液中IgG1单克隆抗体浓度定量的动态范围和重复性

PrismA芯片针对于溶于缓冲溶液中的纯化抗体样品的动态范围可达0.1 μg/mL至 1 mg/mL。针对于IgG1单克隆抗体,使用Biacore 8K+在相同浓度间隔,不同进样时间的条件下,标准曲线重复性依旧非常优异(Fig 5)。

03

确定适宜的细胞株上清IgG浓度定量稀释倍数

针对细胞株上清这类高背景样品,使用缓冲液进行适宜的倍比稀释能够有效降低非特异性结合,提升数据准确性。使用PrismA芯片针对于培养10天的细胞株上清使用缓冲液进行1:10, 1:100, 1:1000倍比稀释,随后对细胞株上清中IgG进行浓度定量,结果可见,1:100的稀释倍数相较于1:10更佳。

04

PrismA芯片在浓度定量时超高的稳定性

使用PrismA芯片,在芯片同一通道上进行总共200次循环检测,每隔100次进行标准曲线验证,实验数据显示即使芯片经过200循环检测,标准曲线依旧保持非常高的重复性(Fig 8)。

Fig 8. Calibration curves run at start (Calibration 1), middle (Calibration 2),and end (Calibration 3) ofthe assay (i.e., every 100 cycles), split into (A) a lower(0.1 to 1.6 g/mL) and (B) a higher (3.1 to 100 μg/mL) range.

了解到这么多关于Series S Sensor Chip PrismA惊艳的表现,相信大家都跃跃欲试,急切地想购买Series S Sensor Chip PrismA用于抗体浓度定量了。具体产品货号见下方,大家行动起来吧!