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常见问题
耗材使用
1. NA/SA
SA芯片一般会用biotin做封闭吗？如果需要用，用什么级别的或者形式的比较好？这个东西是不是残留比较严重？
- 一般不用；
- 如果需要，就用free的biotin封闭一下
SA芯片表面需要先芯片预处理吗？
请按照说明书建议方法使用
芯片是否适合-80℃保存？例如SA
- 一般芯片推荐4℃冰箱进行保存。
- PEG芯片推荐-20℃保存。
芯片保质期？
可参考包装上推荐保质期，但由于芯片金膜组件稳定，且未开封芯片均有惰性气体保护，可使用更长时间。
偶联了蛋白的芯片如何保存？
偶联了蛋白可保存后重复利用，保存时长以配体蛋白活性为准。
有以下两种保存方法可供参考：
- 湿法保存：可以去掉芯片壳，中间的一整片芯片直接放在running buffer中，储存在50mL离心管里，放入4℃冰箱中即可。
- 半干法保存（短时）：将缓冲液buffer滴在偶联蛋白那面的金膜上，平放入4℃冰箱中即可。
- 重复使用时，切记保证芯片表面干燥后再进行使用（不可擦拭芯片表面）。
芯片从冰箱拿出后的处理？
- 新的芯片室温回温半小时即可使用
- 已经有偶联蛋白的旧芯片从buffer中拿出来可以用水（或去离子水）冲玻璃一面，用无尘纸蘸干（最好不要来回擦），金膜一面不用水冲，倾斜芯片，水就会聚在一角，也是用无尘纸折成一个角，在聚集的水上吸干净即可（请勿直接接触金膜表面）。
系统测试使用的芯片是哪一种？维护芯片可以使用吗？
系统测试使用的芯片必须是新的CM5，其他芯片均不可以。
2. 其它试剂及耗材使用
Biacore做分子互做实验的时候，该怎么选Buffer呢？
- 一般而言，常见的缓冲溶液，例如PBS，HEPES等盐溶液都能做Buffer使用。
- 按照经验，HEPES（2- 羟乙基 -1- 哌嗪乙烷磺， pKa 7.55） 是一种适用于许多蛋白 – 蛋白相互作用的理想缓冲成分， 现有商品化的 10 mM HEPES 缓冲液与 Biacore 系统配套一起使用。
- PBS缓冲液通常更适合用于小分子分析物， 这是因为有机缓冲成分如 HEPES 能够与配体结合并干扰低分子量化合物的准确检测。
- 激酶(Kinase)实验则使用Tris缓冲液。
Biacore做分子互做实验的时候，Buffer中的盐离子浓度有什么影响吗？
如果发生非特异性结合， 则可能需要尝试更高的离子强度来降低非特异性结合。
表面活性剂P20和EDTA的作用是什么？
- 推荐在所有缓冲液中包含非离子型表面活性剂（0.05% 表面活性剂P20） 以尽量减少蛋白质和其他生物分子在流动系统中发生沉淀的可能。需要注意的是一些应用需要缓冲液中不包含表面活性剂， 特别是那些涉及脂类囊泡和 /或疏水性蛋白的应用。
- EDTA 以去除可能存在于缓冲液中的微量游离二价金属离子。
Biacore耗材中的橡胶冠盖能否重复使用？怎么清洗？
橡胶管盖可以重复使用，使用时现将管盖用ddH2O清洗干净，放入70%的乙醇溶液浸泡，再次使用时用清水冲洗并风干管盖。
Biacore maintenance kit type2 里面没有BIAdisinfectant solution了？
该试剂为次氯酸钠，因为是危险化学药品，海关不能进口，需要自行购买（尽量购买有效氯浓度高一些的10%-15%的次氯酸钠，推荐分析纯），工作使用时有效氯使用浓度1%，过滤后使用即可。