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询价Biacore“双参数筛选”，一举而兼两“果”也
抗体生产的实验人员都希望获得高表达量、高特异性、高亲和力的克隆。为了确定候选分子是否能够成功地从发现阶段到后续开发，科学家们会在多轮筛选中充分评估它们的理化性质。筛选高表达单克隆细胞株是细胞株构建的关键步骤，衡量标准包括抗体表达量、结合活性、代谢稳定性、细胞稳定性等。尤其是在筛选阶段，时间紧、任务重，单个克隆样品量通常较少，实验人员急需一种快速、稳定、准确、样品消耗量低的方法来帮助他们做出筛选的决策。
实验材料与方法设置
使用S系列传感器芯片CM5，在16个flow cells中都氨基偶联上兔抗鼠抗体。固定水平约为10000 RU。使用小鼠单克隆抗体作为配体，使用12 kDa蛋白作为分析物。使用捕获试剂盒中提供的试剂（10 mM甘氨酸-HCl pH 1.7）进行再生。
图1：Biacore 8K+ SPR系统配备了8个进样针，每个进样针对应两个flow cells。
- 在参比通道和检测通道中都固定捕获抗体分子；
- 在检测通道中注入抗体。抗体结合到捕获分子上，该响应值用于确定抗体滴度；
- 在参比通道和检测通道中同时注入分析物以获得抗体结合动力学数据。
图2：设置双参数筛选。抗体滴度是通过评估与捕获分子的结合信号来获得的。抗体动力学是通过评估分析物与抗体的结合来获得的。
双重参数筛选结果分析
第一步
使用平行浓度分析评估滴度
第二步
动力学分析
图4：使用双参数筛选评估动力学。(A) 单浓度动力学拟合示例，(B) 等亲和力线图展示了抗体样品具有很好的检测重复性。
新方法的优势
第一
使用双参数筛选节省时间和样品
图5：运行时间示意图
第二
平行浓度分析，打消通道间差异的顾虑
使用平行浓度分析装置评估抗体滴度时，每个通道会添加一个校准点。我们使用通道归一化功能，根据通道间校准点的结果，来进行信号补偿，调整由于固定量造成的通道间的微小差异。使得所有通道间的数据具有极高的一致性和可比性。
图6：双参数筛选测定步骤示意图。
第三
宽泛的样品兼容性
第四
高通量及自动化
小 结
更快地获得结果，有助于您更有效地利用时间；
更少的样品需求，保留您的珍贵样品以供后续研究；
更多的数据维度，帮助您在有限的时间内快速做出决策；
更稳定的实验结果，更加便于标准化及方法转移。