Biacore实验指南（三）| 病毒颗粒类实验，这么做更容易！

11 月 17, 2023

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周三早上十点，工程师小荣正在赶往火车站的路上，手机突然响起。

客户张老师

Hi，荣工，我们刚接一个项目，是病毒颗粒检测耶，你们家的Biacore能做吗？

工程师小荣

张老师请放心，Biacore采用“持续流”检测技术，对样本来源及分子量没有要求，病毒颗粒so easy！

客户张老师

哇哦~那太好啦。请赶紧教教我怎么做吧！

工程师小荣

好滴，请跟随我如下讲解，您一学便会哟~

病毒颗粒做固定相

芯片：CM5芯片

缓冲液：PBST buffer

再生液：4 M NaCl

样品制备：病毒颗粒Echo6或CV-B4氨基偶联于CM5芯片上，FcRn或CD55分子做为流动相进行检测

图1：病毒颗粒Echo6/CV-B4与FcRn/CD55分子的互作情况^[1]

芯片：CM5芯片

缓冲液：PBST buffer

再生液：10 mM glycine-HCl (pH 1.7)

样品制备：病毒颗粒E30-F氨基偶联于CM5芯片上，抗体6C5、4B10等做为流动相进行亲和力检测；竞争实验中，采用连续进样方式进样多个分子，进行表位分析

图2：病毒颗粒E30-F与不同分子的互作情况及表位识别情况^[2]

芯片：SA芯片

缓冲液：PBST buffer

再生液：常规再生液

样品制备：CV-A10病毒颗粒进行生物素修饰，包被于SA芯片；可溶性蛋白KRM1等做为流动相进行检测

图3：蛋白KRM1与病毒CV-A10在中性及酸性pH中的互作情况^[3]

芯片：Protein A芯片

缓冲液：常规buffer

再生液：10 nM glycine buffer (pH 1.5)

样品制备：抗体Ab-5F5捕获于Protein A芯片表面，随后病毒颗粒CVB1做为流动相进行检测

图4：抗体Ab-5F5与病毒颗粒CVB1的互作情况^[4]

芯片：CM5芯片

缓冲液：HBS buffer

再生液：常规再生液

样品制备：抗体GAM-Fc氨基偶联于CM5芯片表面，随后抗体及病毒颗粒p239依次流过芯片表面进行测试

图5：疫苗Hecolin质控的流程图及结果^[5]

客户张老师

Hi，荣工，非常感谢您这几个案例的讲解！得嘞，我会做啦。

工程师小荣

好的，常联系。~

小结

Biacore兼具灵敏度、准确度、检测通量，是受大家广泛认可的分子间相互作用分析设备，对于样本没有来源及种类的限制，常见的生物学样本（蛋白、多肽、小分子、核酸、病毒颗粒、血清等），均可以进行上样检测，满足大家的实际需求。大家快来一起设计方案吧！