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询价Biotin CAPture Kit方案：轻松搞定生物素化配体可逆捕获！
什么是Biotin CAPture Kit？
传统的SA/NA芯片可以将生物素化的配体不可逆地固定于芯片表面，而Biotin CAPture Kit提供了一种可逆捕获生物素化配体的方案，先在芯片上搭建一层改造的带有Streptavidin的核酸，即Biotin CAPture reagent，再将生物素化的配体捕获到CAP芯片表面，检测完成后用固定的再生液将配体/分析物/Biotin CAPture reagent洗掉进行下一轮进样，实现了生物素配体的可逆捕获（图1）。
图1：Biotin CAPture Kit工作示意图
“Inject and elute”是一个强大的功能模块，它可以用来从传感器芯片的配体上洗脱结合的分析物，并将其收集到目标样品管中。通过重复的“上样-洗脱-回收循环”，可以将目标组分从复杂的样品溶液中“钓出”，并显著提高其浓度，从而方便进行后续的成分鉴定及分析。
2024年，厦门大学在《Nature Communications》期刊发表研究论文，提出利用更多样化的二硫键导向基序构建多环肽库，为拓展功能肽的序列与结构空间开辟了新路径。
研究中使用Biotin CAPture Kit检测了多肽和蛋白靶点EphA2/HER3/ICOS的结合亲和力，生物素化的蛋白通过Biotin CAPture reagent固定到CAP芯片表面，设置多肽的浓度梯度进行检测。
图2：多肽与HER3的亲和力检测
由于Biotin CAPture Kit可以实现生物素化蛋白的可逆捕获，可以更换配体蛋白完成多组实验。
图3：ICOS/EphA2结合肽亲和力的优化
检测抗体和GPCR的互作
2019年上海药物所在《Structure》上发表文章，介绍了利用合成抗体 (sAB) 作为标记物，通过单颗粒冷冻电镜 (SP cryo-EM) 技术研究G蛋白偶联受体 (GPCR) 信号复合物结构的方法。文章的核心是开发了一系列针对G蛋白和GRK1的sAB，并验证了它们在结构研究中的应用价值。
其中GRK1蛋白带有Avi-tag，研究中使用Biotin CAPture Kit固定GRK1蛋白，完成了亲和力、结合表位以及野生型/突变体结合差异的研究。
图4：针对GRK1蛋白的抗体表位研究及突变体研究
Biotin CAPture Kit
检测多肽/小分子和蛋白的互作
2020年Roche在《Journal of Biological Chemistry》上发表文章，探讨了小分子AX-024对T细胞增殖的影响及其作用机制，有助于更好地理解AX-024的作用机制，为开发治疗自身免疫性疾病和炎症性疾病的新药物提供线索。
研究中，将生物素化的Nck1-SH3.1蛋白通过Biotin CAPture Kit固定于CAP芯片，检测与CD3γ衍生肽和AX-024的结合。
结果表明接头蛋白Nck与TCR的CD3ε亚基结合，对TCR信号传导至关重要，但AX-024并未与Nck1-SH3.1直接结合，其作用机制可能并非通过抑制Nck/TCR相互作用来实现，AX-024的确切靶点仍需进一步研究。
图5：CD3ε肽（左图，Kd=8.3±0.1μM）/AX-024与Nck1-SH3.1结合
Biotin CAPture Kit作为一种可逆捕获生物素化配体的实验方案，可以检测蛋白/多肽/小分子等多种样品，并且兼容多循环动力学和单循环动力学，完成包括亲和力检测/表位检测等多种研究。