离子交换层析机理建模实验设计方案

Experimental planning of protein runs for mechanistic modeling of ion exchange chromatography in bind-elute mode

机理建模中的系统和层析柱表征

GoSilico™ Chromatography Modeling Software is a multi-purpose simulation software that provides tools for efficient and accurate solutions for a wide range of problems in liquid chromatography.

His标签亲和层析产品

组氨酸 ( His ) 标签是纯化重组蛋白中常用的一种蛋白标签，因其结构简单，分子量小，载体易于构建，而受到广大研究人员的青睐。用于纯化 His 标签蛋白质的层析填料既有预螯合 Ni2+ 或 Co2+ 金属离子的，也有未螯合的。未螯合的填料可根据实验需求螯合不同的金属离子，以调整选择性。

Biacore 1K分子互作分析系统操作指南

Biacore 1K 分子互作分析系统操作指南

Biacore X100 捕获法检测抗原与抗体相互作用

利用 Biacore™ X100 检测抗原与抗体结合的亲和力 KD 与动力学数据 ka，kd。本实验利用Portein A芯片，捕获抗体 A，抗原 B 作为分析物，检测结合的亲和力与动力学。也可使用CM5 + HumanAntibody Capture Kit （货号：29234600）/Mouse Antibody Capture Kit（货号：29215281） 进行捕获法捕获抗体 A，抗原 B 作为流动相进行检测。本指南所用抗体 A，分子量为 150kD，抗原 B 分子量为 12.5 kD。

Biacore X100 检测蛋白与小分子相互作用

利用 Biacore™ X100 系统和 CM5 芯片检测小分子与蛋白结合的动力学和亲和力数据。本实验使用的小分子分子量为 400 Da，蛋白分子量为 20kD。若蛋白与小分子的分子量比大于100，换用 CM7 芯片。

Biacore X100 检测蛋白与核酸相互作用操作指南

利用 Biacore™ X100 与 SA 芯片检测蛋白与核酸结合的动力学数据 ka、kd 和亲和力数据 KD。若有大量检测带 biotin 标签的样品待检测，可选择 Biotin CAPture Kit，Series S（货号：28-9202-34）来进行检测。本实验使用的核酸为 Lac O1（乳糖操纵序列 O1），由 23 对互补碱基构成的双链DNA，DNA的5’ 端带有生物素化标签，分子量约为 14.5 KD；蛋白为 Lac 1（乳糖操纵阻抑蛋白），分子量为 39.4 KD。本实验利用 SA 芯片固定生物素化修饰的 Lac O1 双链DNA，Lac 1 蛋白作为分析物检测其结合的动力学和亲和力数据。

Biacore X100 检测蛋白与蛋白相互作用

利用 Biacore™ X100 检测蛋白与蛋白结合的亲和力 KD 与动力学数据 ka，kd。本实验利用 CM5芯片直接偶联蛋白 A，蛋白 B 作为分析物检测结合的亲和力。若要检测多个蛋白与不同蛋白的互作，可根据蛋白所带的 tag，选择偶联相应的捕获分子如 tag 标签抗体等，通过捕获法来进行检测，具体操作可参考《Biacore 捕获法检测抗体与抗原结合操作指南》。本指南所用蛋白 A分子量为 24kD，蛋白 B 分子量为 21kD。

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