温和洗脱，高效纯化：MabSelect mild elution填料助力抗体生产新突破

随着抗体药物的快速发展，双特异性抗体（bsAb）、多特异性抗体（msAb）及抗体片段等新型分子层出不穷，纯化工艺面临前所未有的挑战。传统蛋白A亲和层析在低pH（pH 3.5-4）洗脱时易导致酸诱导聚集，这会影响某些对酸敏感分子的得率和纯度。

针对这类难题，Cytiva推出全新protein A亲和填料：

MabSelect mild elution

以高pH洗脱（约pH 5）为核心优势

为pH敏感型抗体分子提供温和

高效的捕获方案

助力提升工艺经济性和规模化生产稳定性

图1：MabSelect mild elution填料，提供多种规格

产品亮点

为何选择MabSelect mild elution填料？

高pH洗脱，避免聚集：洗脱pH提升至约5.0（传统protein A为pH 3.5-4），显著减少酸诱导聚集，提高目标抗体得率；

高动态结合容量（DBC）：在6分钟保留时间下，DBC >60 mg mAb/mL填料，保障捕获效果并提高经济性；

适配稳定商业化生产：耐碱性优异（CIP pH范围2-13.4，即0.25 M NaOH），良好的压力流速特性支持大规模生产，并提供法规支持文件。

性能验证

数据说话，纯化更稳健

温和洗脱降低HCP残留

传统低pH洗脱可能导致宿主细胞蛋白（HCP）与目标分子共洗脱。MabSelect mild elution填料通过高pH洗脱，实现更高效的HCP清除。实验显示，与MabSelect PrismA树脂相比，其洗脱池中HCP浓度显著降低（图2），杂质去除率提升3个对数级。

图2：两款填料的HCP清除效果对比

病毒清除效率优异

针对小鼠微小病毒（MVM）和逆转录病毒样颗粒（RVLP）的清除测试中，MabSelect mild elution 填料分别实现5.1和4.6个对数级降低，优于传统填料的2-3个对数级表现，这为生物安全性添加充足的保障。

碱性稳定性支撑长期使用

在加速循环实验中，填料经过96次0.25 M NaOH清洗后，相对剩余DBC仍达94%；200次循环后仍维持约80%载量（图3），优秀的耐碱性能够有效减少生产批次间的生物负荷污染，并且充分延长填料的寿命，让工艺更具备安全性和经济性。

图3：MabSelect mild elution的耐碱性能实验

案例分享

双抗纯化，一步到位

对于不对称双抗艾美赛珠单抗，其两侧Fc区域有所差别：FcB区域经过突变后失去了与protein A结合的能力，而FcA可以正常结合。所以可采用MabSelect mild elution填料，通过特异性结合FcA区，实现目标异源二聚体与杂质（主要为同源二聚体）的高效分离。

结果如图所示，由于FcB同源二聚体无法与填料结合，所以会直接流穿；梯度洗脱阶段，异源二聚体在pH 5.0洗脱，而同源二聚体由于结合力更强，在pH 4.6洗脱，分辨率良好（图4）。且由于洗脱pH较温和，充分保持了目的分子的活性和收率。

图4：使用MabSelect mild elution填料进行双抗分子纯化实验

作为Cytiva mAb填料工具箱的重要成员，MabSelect mild elution填料以温和洗脱条件、高载量和稳健的性能，为pH敏感型抗体分子提供了全新的纯化方案。