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Cytiva(思拓凡)生命科学与生物制药

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2-D 定量试剂盒

2-D 定量试剂盒
2-D定量试剂盒用于准确定量将进行电泳分析,如双向电泳、SDS-PAGE或等电聚焦电泳(IEF)的样品蛋白浓度。

2-D 定量试剂盒
所需样品体积 1 μl
最大样本体积 50 μl
分析条件 480 nm 1 小时
线性 0~50 μg
储存条件 2 – 8°C
套件组成 沉淀剂 250 ml 共沉淀剂 250 ml 铜溶液 50 ml 显色剂 A 2 x 250 ml 显色剂 B 5 ml BSA 标准品 5 ml (2 mg/ml)
过流部件
指南 此试剂盒用于比色法定量蛋白质浓度。 此试剂盒含有足够 500 份样品的试剂。
DIGE 批准 Y

包装规格:500 次测定

2-D定量试剂盒用于准确定量将进行电泳分析,如双向电泳、SDS-PAGE或等电聚焦电泳(IEF)的样品蛋白浓度。
  • 准确定量蛋白浓度,允许存在的污染物有 2% SDS、1% DTT、8 M 尿素、2 M 硫脲、4% CHAPS、2% 两性电解质载体以及 2% IPG 缓冲液。
  • 定量沉淀蛋白,去除干扰物于溶液中。
  • 线性反应范围为 0 – 50 μg 蛋白,推荐样品体积为 1 – 50 μl。

普通的分光光度法定量蛋白质依赖于考马斯染料结合或者蛋白催化二价铜 (Cu2+) 离子还原为一价亚铜 (Cu+) 离子。当溶液中除蛋白样品外还有其他溶剂能够与染料结合时则不能使用此方法。这些物质包括两性电解质载体和去污剂,比如 PlusOne CHAPS、SDS 和 Triton X-100。同样,依赖于铜离子还原作用的分析方法不能在还原剂存在的情况下使用,比如 DTT,也不能用来测定存在可与二价铜离子形成复合物的试剂,比如硫脲或乙二胺四乙酸 (EDTA)。

2-D 定量试剂盒的工作过程是通过定量沉淀蛋白质,将干扰物弃去。此测定法的原理是基于铜离子与蛋白质的特异结合。用含铜溶液将沉淀的蛋白质重悬,用比色剂测定未结合的铜。样品在 480 nm 波长的吸光度值与蛋白质浓度成反比。本测定法对蛋白质的线性反应范围是 0 – 50 μg,推荐的样品量为 1 – 50 μl。

经测试与 2-D 定量试剂盒兼容的试剂

被测试的化合物:浓度 SDS:2% (w/v) CHAPS:4% (w/v) Triton X-100:1% (w/v) Pharmalyte, pH 3-10:2% (v/v) IPG 缓冲液,pH 3-10 NL:2% (v/v) Tris:50 mM 乙二胺四乙酸 (EDTA):10 mM DTT:1% (65 mM) 2-巯基乙醇:2% (v/v) 尿素:8 M 硫脲:2 M 甘油(丙三醇):30% (w/v)

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