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用于纯化带组氨酸标签蛋白的Ni Sepharose excel 镍柱亲和层析蛋白纯化填料

Ni Sepharose Excel是Cytiva专为组氨酸标签蛋白纯化设计的镍柱亲和层析填料,其独特的配基结构能有效降低镍离子脱落,即使样本中含有螯合剂也能保持稳定,从而最大化蛋白回收率。该填料适用于从实验室研究到工艺开发的各类His标签蛋白纯化需求。

Ni Sepharose Excel 是一种用于纯化带组氨酸标签(His-tag)蛋白的镍柱亲和层析填料。当样本中含有螯合剂时,该填料可将镍离子脱落降至最低,同时最大化蛋白回收率。

该填料由 90 μm 高度交联的琼脂糖珠(6% 交联度)组成,其上已结合螯合配体并预装填 Ni²⁺ 离子。填料与  Ni2+ 离子具有极强的结合力,打破了常规 Ni 填料的局限,能够耐受 100 mM EDTA,大大扩展了缓冲液的兼容性,从而省去了置换缓冲液的操作步骤。

Ni Sepharose Excel 具有较高的耐碱性,可耐受 1 M NaOH。彻底清洗 Ni 填料不再需要先脱镍步骤,直接使用 NaOH 即可彻底清洗,避免交叉污染,节省时间并提高效率。

产品规格

  • 基质粒径:90μm 高度交联琼脂糖基质
  • 动态结合载量:高达 10 mg/mL 填料

产品形式:

产品优势

1. 抗镍离子脱落:与 Ni²⁺结合牢固,10 mM EDTA 孵育 24 小时仍稳定结合,耐受 100 mM EDTA
2. 缓冲液兼容性强:无需缓冲液置换,可直接上样含螯合剂的样本
3. 耐碱易清洁:可耐受 1 M NaOH,无需脱镍即可直接 CIP 清洗,避免交叉污染
4. 结合载量高:蛋白结合载量可达 10 mg/mL 填料,纯化效率优异
5. 适用规模广:流速性能优异,支持微量筛选至大批量样本纯化
6. 操作流程简化:真核细胞上清可直接上样,省去繁琐预处理步骤

应用场景

  • 核心应用:各类组氨酸标签重组蛋白的亲和纯化
  • 样本类型:大肠杆菌原核样本,及 CHO、昆虫细胞、HEK293、BHK 等真核细胞样本
  • 典型场景:真核细胞培养上清直接纯化、低浓度目标蛋白手动 / 自动化纯化
  • 科研应用:已用于膜蛋白结晶、受体蛋白、蛋白酶、细菌粘附素等研究项目
  • 实验阶段:早期高通量筛选、实验室小规模纯化、中试制备级纯化

 

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